MACAM – MACAM STERIL EKSPLAN

MACAM – MACAM STERIL EKSPLAN

Download File

Keyword :

macam – macam steril eksplan dalam kultur jaringan inisiasi kultur yang bebas dari kontaminan merupakan langkah yang sangat penting karena tanaman yang dari lapang mengandung debu kotoran-kotoran dan berbagai kontaminan hidup pada permukaannya kontaminan hidup dapat berupa cendawan bakteri serangga dan telurnya tungau serta spora-spora bila sumber kontaminan ini tidak dihilangkan maka pada media yang me-ngandung gula vitamin dan mineral akan ditumbuhi oleh jamur dan bakteri apabila eksplan terkontaminasi maka akan mati oleh persenyawaan beracun yang di produksi dan dikeluarkan oleh bakteri atau jamur pada beberapa tanaman ditemukan juga kontaminan yang berasal dari dalam jaringan tanaman terutama bakteri kontaminan internal ini sangat sulit diatasi karena sterilisasi permukaan tidak menyelesaikan masalah pada bahan tanaman yang mengandung kontaminan internal harus diberi perlakuan antibiotik atau bakterisida yang sistemik tiap bahan tanaman mempunyai tingkat kontaminasi permukaan yang berbeda-beda tergantung dari 1 jenis tanamannya 2 bagian tanaman yang dipergunakan 3 morfologi permukaan ex berbulu atau tidak 4 lingkungan tumbuhnya green house atau lapangan 5 musim waktu mengambil musim hujan atau kemarau 6 umur tanaman seedling atau tanaman dewasa 7 kondisi tanamannya sehat atau sakit beberapa jenis bahan disenfektan yang dapat digunakan untuk sterilisasi bahan tanaman no bahan konsentrasi lama perendaman 1 kalsium hipoklorit 1 – 10 5 – 30 menit 2 natrium hipoklorit 1 – 2 7 – 15 menit 3 hidrogen peroksida 3 – 10 5 – 15 menit 4 perak nitrat 1 5 – 30 menit 5 merkuri klorit hgcl2 0.1 – 0.2 10 – 20 menit 6 bethadine 2.5 – 10 5 – 10 menit 7 fungisida 2 g l 20 – 30 menit 8 antibiotik 50 – 100 mg l ½ - 1 jam kelompok 1 1 dimas gusti r 2 musthofa afifi 3 bernadenta careca r 4 aminullah ibrahim 5 hery setyono page 2 of 4 9 alkohol 70 1 – 10 menit 10 bayclin sunclin 5 – 30 5 – 25 meni sebagai patokan konsentrasi bahan dan waktu yang diperlukan untuk sterilisasi eksplan sebagai berikut 1 sterilisasi ringan eksplan kuljar direndam dalam cairan pemutih pakaian 20 selama 10 menit lalu bilas dengan air steril setelah itu eksplan direndam dalam cairan pemutih pakaian 15 selama 10 menit lalu bilas dengan air steril terakhir eksplan direndam dalam cairan pemutih pakaian 10 selama 10 menit lalu dengan air steril tiga kali 2 sterilisasi sedang eksplan kuljar direndam dalam hgcl2 0 1-0 5 mg l selama 7 menit lalu dibilas dengan air steril setelah itu eksplan direndam dalam cairan pemutih pakaian 15 selama 10 menit lalu bilas dengan air steril terakhir eksplan direndam dalam cairan pemutih pakaian 10 selama 10 menit lalu dibilas dengan air steril tiga kali 3 sterilisasi keras eksplan kuljar direndam dalam hgcl2 0 1-0 5 mg l selama 10 menit lalu bilas dengan air steril setelah itu eksplan direndam dalam alkohol 90 selama 15 menit lalu bilas dengan air steril terakhir eksplan direndam dalam cairan pemutih pakaian 20 selama 10 menit lalu dibilas dengan air steril tiga kali sterilisasi eksplan atau bahan sterilisasi eksplan dapat dilakukan melalui dua cara yakni secara mekanik dam kimiawi 1 sterilisasi eksplan secara mekanik cara ini digunakan untuk eksplan yang keras atau berdaging yaitu dengan membakareksplan di atas lampu spiritus sebanyak 3 kali eksplan keras yang disterilkan dengan cara ini antara lain adalah tebu salak bung buah anggrek kapulaga dan lain-lain sedangkan eksplan berdaging seperti wortel umbi bawang putih dan lain- lain hendaryono 1994 2 sterilisasi eksplan secara kimiawi metode ini digunakan untuk eksplan yang lunak jaringan muda seperti daun tangkai daun anther dan sebagainya bahan-bahan kimia yang dapat digunakan untuk sterilisasi ini antara lain a sodium hipoklorit disebut juga clorox atau bayclin konsentrasi untuk steril tergantung dari eksplan dapat 5 -10 dengan waktu atara 5-10 menit pembuatan larutan ini dengan mencampur clorox dan aquades 1 4 kemudian ditambah dengan tween-20 sebanyak satu tetes b mercuri khlorit disebut juga sublimat 0 05 penggunaan bahan kimia ini harus hati-hati karena sifatnya beracun cara perlakuan sterilisasinya adalah sama dengan clorox namun page 3 of 4 waktunya lebih pendek sterilisasi terlalu lama akan menyebabkan kerusakan pada eksplan warna coklat sehingga eksplan tidak mampu membentuk kalus c alkohol 70 lebih banyak diperdagangkan dalam bentuk alkohol 95 jamur biasanya mati dengan alcohol 70 sedangkan dengan alcohol 95 tetap hidup alkohol 95 diencerkan menjadi 70 dengan menambahkan aquades sebanyak 70ml ke dalam gelas ukur yang berisi alkohol 95 sebanyak 25ml sehingga volume akhirnya 95ml hendaryono 1994 metode percobaan ini bertujuan melihat dan membandingkan proses sterilisasi ekplan yang efektif pada daun keladi merah dan batang geranium bahan tanaman yang digunakan daun keladi merah batang geranium dithane – m95 agrept bayclin alkohol 70 media ¼ ms dan detergen alat – alat yang digunakn dalam praktikum ini adalah botol kultur alat – alat dissecting set dan laminar air flow cabinet daun keladi merah dan geranium dicuci dengan detergen selama lima menit kemudian dipotong menjadi dua bagaian dan batang geranium dipotong dari tangkai dan daun kedua bahan tersebut dimasukan ke dithane m – 95 1gram 500 ml dan 1 agrept 1gram 500 ml dikocok selama 20 menit dan dibilas dengan air keran kemudian dimasukan ke alkohol 70 untuk keladi 30 detik dan geranium 60 detik proses selanjutnya adalah dimasukan ke dalam bayclin 10 10m bayclin 5 selama lima meit dibilas dengan aquades steril tiga kali dan ditanam di media ¼ ms amatilah pertumbuhannya sampai minggu keempat contoh sterilisasi eksplan disini dicontohkan sterilisasi beberapa jenis tanaman sebagai berikut a sanseviera 1 potong daun menjadi ukuran 1 5 x 2 cm atas bawah daun jangan terbalik tandai bagian bawah dengan memotong agak miring 2 masukan eksplan dalam botol kaca botol selai steril kemudian masukan dan rendam dalam larutan asam sitrat dan asam askorbat vitamin c selama 15 menit tahap ini boleh dilakukan boleh juga tidak kalau tidak langsung ke no 3 3 cuci di air mengalir deterjen misalnya sunlight 15 menit 4 shaker dalam larutan fungisida dithane 4 gr 100 ml selama 30 menit lalu bilas dengan air steril sampai sisa fungisida hilang biasanya diperlukan 5 kali bilasan 5 shaker dalam larutan bakterisida agrept 4 gr 100ml selama 30 menit lalu bilas dengan air steril sampai sisa bakterisida hilang 6 rendam sambil digoyang dalam alcohol 75 selama 5 menit lalu bilas dengan air steril sampai sisa alkohol hilang 5 kali pada tahap ini dilakukan dalam laminar enkase 1 of 4 kelompok 1.docx